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Siga este procedimiento para generar una superficie de contacto típica:
Cargue 1b07. Entre :*a en la ventana "supeficie sobre". Entre :*c en la ventana "contactado por". Apriete el botón [Generar]. Haga zoom.
La superficie oscura representa la superficie accesible al solvente
del "receptor" (cadena A,*a), que es un dominio de homología Src
tipo 3 (dominio SH3).
La zona más clara sobre la superficie oscura representa la porción
próxima al "ligando" al que podría enlazarse, la llamada "superficie de
contacto". El "ligando" (cadena C, *c) es un péptido regulador.
Los
colores de la superficie de contacto nos dan una información
general sobre el patrón de enlaces. Cuatro manchas grandes magenta
muestran las posiciones de los contactos más próximos. Cada mancha magenta
grande representa un puente de hidrógeno. Se observan 3 bolsillos hidrofóbicos
blancos,
que acomodan a la Pro4, Val7 y Pro8 en el ligando.
Marque la opción "Ocultar la superficie sin contactos del "receptor" y vuelva a apretar el botón [generar superficie]. Esta opción oculta la mayor parte de la superficie del receptor -- únicamente la superficie de contacto permanece visible. Gire la molécula -- ahora puede puede ver la parte posterior (la cara que se dirige hacia el receptor) ya que ahora no está cubierta por el resto de la superficie del receptor.
Ahora
seleccione la opción Mostrar átomos enlazados del receptor
(opción O/N) y apriete nuevamente el botón [generar superficie].
La superficie de contacto es ahora transparente.
En la superficie del lado del "receptor" se muestran oxígenos y
nitrógenos (como esferas pequeñas, "bolas") tan próximos a
los oxígenos y nitrógenos del "ligando" que podrían formar
puentes de hidrógeno (3.5
Angstroms o más cercano). Cada uno puede juzgar si existe o no puente de
hidrógeno. Puede hacer click sobre cualquier átomo para identificarlo, y
también utilizar los comandos "set picking distance" o "set picking monitor"
para determinar las distancias entre pares de átomos seleccionados haciendo
click con el ratón. (Las abreviaturas para estos comandos son "spd" y "spm".)
Seleccione C/S/X (carbono, azufre) en lugar de O/N, y apriete otra vez el botón de [generar superficie]. En la superficie del lado del "receptor" se muestran ahora carbonos y azufres del "receptor" suficientemente próximos a carbonos y azufres del "ligando" para establecer enlaces de van der Waals (4.5 Angstroms o más próximo). Cada uno puede decidir si se establece o no la interacción hidrofóbica. también se muestran otros átomos del receptor distintos del carbono, azufre, oxígeno o nitrógeno (v.g. metales) que estén dentro de una distancia de 4.5 Angstroms de cualquier átomo del ligando. Puede hacer click sobre cualquier átomo para identificarlo.
Acaba de ver un ejemplo de superficie de contacto. Puede realizar un análisis visual más detallado de las interacciones no covalentes con Buscador de interacciones no-covalentes.
No es necesario poseer ligando y receptor distintos para que la superficie de contacto sea útil. Por ejemplo, Ud. puede seleccionar un segmento arbitrario de la proteína y examinar sus contactos con el resto de la proteína. Para ver un ejemplo utilizamos 1b07 aún cargado, hacemos click en el botón [ocultar] y tecleamos los comandos siguientes:
r none s all bb 0.3 s 179-183 co greenCon estos comandos destacamos un segmento, residuos 179-183, enterrado en medio del complejo.Ahora introducimos en la ventana superior del receptor "not 179-183" y en la del ligando "179-183", y generamos las diversas superficies de contacto. No todos los átomos enlazados vienen de la cadena A -- no se excluyo la cadena b del "receptor" de forma que contribuye a la superficie :a and not 179-183
Vea el tutorial para una introducción menos técnica.
La superficie que se genera es una superficie accesible al agua generada con una prueba que va rodando ("rolling probe") . Una prueba esférica de 1.4 Angstroms de radio (el radio convencional de una esfera del tamaño del agua) se hace rodar sobre la superficie del "receptor". La prueba rueda en loops paralelos separados 0.8 Angstroms entre sí. La superficie resultante representa todos los contactos de la superficie de la prueba con la superficie del receptor.
Cuando la superficie sin contactos del receptor se oculta, el límite de la superficie de contacto del receptor se encuentra a 4.1 Angstroms del átomo más próximo del ligando. Este límite es de color gris. Porciones de la superficie de contacto más próxima a los átomos del ligando van siendo gris más claro, blanco, magenta pálido, y magenta. Colores gris a blanco serían zonas implicadas en interacciones hidrofóbicas, regiones magenta estarían implicadas en la formación de puentes de hidrógeno.
Los átomos que constituyen el "Receptor" y el "Ligando" son arbitrarios, y se definen por las expresiones que se escriben en las respectivas ventanas del panel de control. Los términos "rec" y "lig" son definidos cuando se genera una superficie de contacto.
select rec color chainy utilizando abreviaturas se simplifica a
s rec coc
Si bien los aceptores y donadores en los puentes de hidrógeno suelen ser nitrógeno u oxígeno, cualquier otro átomo que no sea carbono o azufre se muestra como posible Donador/Aceptor de pH (PHDA). Ligando PHDA a una distancia de 3.5 Angstroms de receptor PHDA es considerado a distancia para formar puentes de hidrógeno.
Para interacciones hidrofóbicas, carbonos o azufres del ligando dentro de una distancia de 4.5 Angstroms de carbonos o azufres del receptor se muestran como a distancia de enlace.
"X": átomos del ligando diferentes de oxígeno, nitrógeno, carbono, o azufre (v.g. metales) dentro de una distancia de 4.5 también se muestran.
O/N, cuando está seleccionada esta opción, se muestran oxígenos y nitrógenos en el receptor que se encuentran a distancia de enlace de átomos del ligando; C/S/X muestra carbonos, azufres, o cualquier átomo no-O/N del receptor que se encuentre a distancia de enlace de los átomos del ligando.
Una vez generados las visualizaciones O/N o C/S/X , los conjuntos de átomos del receptor a distancias de enlace de los átomos del ligando pueden seleccionarse con las expresiones bron ("Bonded Receptor O/N") o brcs. Así por ejemplo, después de generar la imagen O/N , se puede colorear los oxígenos unidos al receptor de color verde y todos los otros oxígenos en rojo utilizando los siguientes comandos:
s rec and oxygen coe s bron and oxygen co green
Los siguientes términos se definen durante la creación de una superficie de contacto si las correspondientes categorias se solicitan. Estos términos pueden utilizarse en los comandos 'select' .