(Las animaciones de esta página proceden de Tokyo Medical University, © Hironao Numabe, M.D.)

Nota: los términos médicos pueden no estar correctamente traducidos

• Comprender cómo se describen los cromosomas y cómo se preparan e interpretan los estudios citogenéticos.
• Comprender las anomalías cromosómicas humanas.
• Familiarizarse con los fenotipos de las anomalías cromosoómicas más frecuentes (en particular, el síndrome de Down y el de Turner).
• Conocer los usos y las limitaciones de los estudios citogenéticos para el diagnóstico de desórdenes genéticos.

Def: El estudio de los cromosomas, su estructura y su herencia.

A. Las anomalías cromosómicas son frecuentes.

1. Entre uno de cada 150 y uno de cada 160 recién nacidos tiene una anomalía cromosómica.

2. Al menos el 50% de los abortos espontáneos durante el primer trimestre tiene una anomalía cromosómica.

3. Aproximadamente el 2% de los embarazos en mujeres de más de 35 años tiene una anomalía cromosómica.

Def: Anomalía cromosómica constitutiva = dotación cromosómica al nacer

 

Def: Anomalía cromosómica adquirida = aquélla que aparece en enfermedades hematológicas y tumores sólidos

A. El genoma humano conprende entre 6.000 y 7.000 millones de pares de bases de DNA organizado en 23 pares de cromosomas.

B. El genoma humano contiene aproximadamente entre 50.000 y 10.000 genes.

C. Cada cromosoma consiste en una sola cadena continua de DNA asociada con histonas y otras proteínas no histonas (cromatina).

D. Empaquetamiento del DNA

Doble hélice => fibra de nucleosomas => solenoide => cromatina => cromátida
("collar de perlas")

A. El análisis cromosómico requiere células en división activa
(p.ej., de sangre periférica, médula ósea, tumor sólido, fluido amniótico)

B. Tratamiento de la muestra:

Cultivar las células (48-72 h) -> añadir un mitógeno (que estimula a las células a dividirse) -> añadir un inhibidor de la mitosis (detiene a las células en metafase) -> recoger las células -> añadir una disolución hipotónica (hincha las células) -> fijar las células (con metanol y ácido acético) -> suspensión celular -> extender en los portas -> teñir los portas -> observar al microscopio

C. Extensión de Metafase

VI. Clasificación de los Cromosomas

A. Subgrupos en función de la posición del centrómero

1. Metacéntricos = brazos de longitud aproximadamente igual

2. Submetacéntricos = brazos de longitud desigual

3. Acrocéntricos = el centrómero está próximo a un extremo del cromosoma
- el brazo p está compuesto de satélites y tallos que contienen copias redundantes de genes de RNA ribosómico
 
 

B. Cariotipo

- se muestran los cromosomas ordenados de acuerdo con su longitud y la posición relativa de su centrómero

C. Bandeado de Cromosomas

1. Tinción G (Giemsa)

- el método más frecuente de tinción

Def: Idiograma = representación esquemática del patrón de bandas G de un cariotipo (se numeran los segmentos según la nomenclatura estándar)

 

bandas G-pálidas	bandas G-oscuras
DNA rico en GC	DNA rico en AT
replicación temprana	replicación tardía
Muchos genes	Pocos genes

2. Bandeo inverso o R ("reverso")

- opuesto al bandeo G

- útil para teñir los extremos distales de los cromosomas (deleciones o reorganizaciones distales)

3. Bandeo Q (quinacrina)

- el primer método de tinción desarrollado

- requiere un microscopio de fluorescencia

- bandas Q brillantes = bandas G oscuras

4. Tinción NOR (nucleolar organizing region, región organizadora del nucleolo)

- tiñe los genes de RNA ribosómico situados cerca de las regiones tallo y satélite de los cromosomas acrocéntricos

5. Nivel de bandeo

- varía dependiendo del origen y calidad de la preparación cromosómica:
P.ej.: médula ósea 350 bandas
fluido amniótico 450-550 bandas
sangre periférica 550-750 bandas
prometafase 750-850 bandas

- sistema de notación normalizado

- número total de cromosomas, constitución de los cromosomas sexuales, anomalías

P.ej.: 47, XY, +21 (varón con síndrome de Down)

A. FISH (Hibridación in situ fluorescente)

- técnica desarrollada recientemente en la que un segmento de DNA marcado (sonda) específico para un cromosoma se hibrida con cromosomas en metafase, profase o interfase y luego se visualiza bajo un microscopio de fluorescencia

B. Tipos de sondas para FISH

1. Repeticiones Alfoides

- secuencias repetidas del centrómero que son específicas de cromosomas

- útiles para la FISH de interfase

2. Pinturas de cromosoma completo

- pintan completamente el cromosoma elegido

- útiles en la detección de reorganizaciones cromosómicas y en la identificación de cromosomas marcadores (en la figura, una pintura para el cromosoma 22 detecta un cromosoma marcador)

3. Sondas específicas de secuencia

- dirigidas a una región de deleción crítica

- útiles para detectar síndromes de microdeleción

- p.ej. el síndrome de Williams (del 7q11.23)

C. Cariotipado Espectral

- cariotipado completo de cromosomas por FISH, usando múltiples fluorocromos
 
 

(Ver la Tabla 6-1 del libro para ejemplos adicionales)

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